
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
雞真皮成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
皮膚組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形細(xì)胞
分類
雞原代細(xì)胞
貨號
A01X2309
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常皮膚組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
細(xì)胞簡介:
成纖維細(xì)胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細(xì)胞。由于這些細(xì)胞非常容易培養(yǎng),它們已經(jīng)被廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般而言,成纖維細(xì)胞能夠分泌I型和III型膠原等細(xì)胞外基質(zhì),并且研究表明不同器官中的成纖維細(xì)胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時,真皮成纖維細(xì)胞由可增殖,可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的,可重塑基質(zhì)的表型,同時,它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應(yīng)對修復(fù)時的炎癥反應(yīng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
土壤硅鋁率測試盒
人A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)elisa檢測試劑盒
血液組織L(CATHEPSIN L)活性熒光定量檢測試劑盒
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大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)elisa檢測試劑盒
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FRMD6蛋白抗體 FRMD6
G氨基丁酸A型受體rho1/GABAA Rρ1抗體 GABRR1
膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體 NOD26/NLRX1
腦磺基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白4A1抗體 SULT4A1
多發(fā)性外生骨疣蛋白1抗體 EXT1
泛素蛋白連接酶2E2抗體 UBE2E2
血漿激肽釋放酶重鏈抗體 plasma kallikrein B1 heavy chain
胰島素受體底物-2抗體 IRS-2
RUSC1抗體 RUSC1
SHFM3蛋白抗體 SHFM3
糖基轉(zhuǎn)移酶28家族1抗體 GLT28D1
源轉(zhuǎn)錄因子DLX3抗體 DLX3
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白20抗體 KCTD20
角質(zhì)形成細(xì)胞相關(guān)跨膜蛋白2抗體 KCT2
3號染色體開放閱讀框67抗體 C3orf67
AF680標(biāo)記的半胱氨酸蛋白酶8抗體 caspase-8 subunit p18, Alexa Fluor 680 conjugated
50ml磁力架
雞真皮成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Goat IgG H&L / Gold
ERF3B蛋白抗體
HKQ; Homolog of mouse quaking QKI KH domain RNA binding protein; Hqk; HQK1; HqkI; Protein quaking; QK; QK1; QK3; QKI; QKI_HUMAN; QKI1; Quaking homolog; Quaking homolog KH domain RNA binding; Quaking homolog KH domain RNA binding mouse; Quaking isoform 1; Quaking protein; RNA binding protein HQK.
雞真皮成纖維細(xì)胞
大鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞
NCI-H2073人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
小鼠乳腺癌細(xì)胞;C127
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。